掌握要點(diǎn)合理使用計數板

　　計數板被用以對人體內紅、白血球進(jìn)行顯微計數之用，也常用于計算一些細菌、真菌、酵母等微生物的數量，是一種常見(jiàn)的生物學(xué)工具。
 
　　計數板的使用方法：
 
　　1.視待測菌懸液濃度，加無(wú)菌水適當稀釋(斜面一般稀釋100倍)，以每小格的菌數可數為度。
 
　　2.取潔凈的血球計數板一塊，在計數區上蓋上一塊蓋玻片。
 
　　3.將菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計數板中間平臺兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴(不宜過(guò)多)，讓菌懸液利用液體的表面張力充滿(mǎn)計數區，勿使氣泡產(chǎn)生，并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數區上(不要使計數區兩邊平臺沾上菌懸液，以免加蓋蓋玻片后，造成計數區深度的升高)，然后加蓋蓋玻片(勿使產(chǎn)生氣泡)。
 
　　4.靜置片刻，使細胞沉降到計數板上，不再隨液體漂移。將血球計數板放置于顯微鏡的載物臺上夾穩，先在低倍鏡下找到計數區后，再轉換高倍鏡觀(guān)察并計數。由于生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀(guān)察時(shí)應減弱光照的強度。
 
　　5.計數時(shí)若計數區是由16個(gè)中方格組成，按對角線(xiàn)方位，數左上、左下、右上、右下的4個(gè)中方格(即100小格)的菌數。如果是25個(gè)中方格組成的計數區，除數上述四個(gè)中方格外，還需數中央1個(gè)中方格的
 
　　菌數(即80個(gè)小格)。為了保證計數的準確性，避免重復計數和漏記，在計數時(shí)，對沉降在格線(xiàn)上的細胞的統計應有統一的規定。如菌體位于大方格的雙線(xiàn)上，計數時(shí)則數上線(xiàn)不數下線(xiàn)，數左線(xiàn)不數右線(xiàn)，以減少誤差。即位于本格上線(xiàn)和左線(xiàn)上的細胞計入本格，本格的下線(xiàn)和右線(xiàn)上的細胞按規定計入相應的格中。見(jiàn)右圖:即本格中計數細胞為3個(gè)。
 
　　6.對于出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計算。每個(gè)樣品重復計數2-3次(每次數值不應相差過(guò)大，否則應重新操作)，按公式計算出每mL(g)菌懸液所含細胞數量。
 
　　7.測數完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網(wǎng)格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干，放入盒內保存。